體外線粒體轉(zhuǎn)錄重構(gòu)核心工具-線粒體轉(zhuǎn)錄蛋白｜#81 Human mtRNAP

簡(jiǎn)介：

線粒體是細(xì)胞能量代謝核心細(xì)胞器，線粒體 DNA（mtDNA）編碼氧化磷酸化關(guān)鍵亞基，其轉(zhuǎn)錄過程直接調(diào)控細(xì)胞衰老、氧化應(yīng)激、腫瘤代謝、線粒體遺傳病發(fā)病機(jī)制。人體線粒體轉(zhuǎn)錄依賴人源線粒體 RNA 聚合酶（POLRMT/mtRNAP），搭配 TFAM、TFB2M 轉(zhuǎn)錄因子共同啟動(dòng) LSP/HSP 線粒體啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄PMC。當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室開展體外轉(zhuǎn)錄重構(gòu)普遍存在幾大難題：

1）市面重組 mtRNAP 活性參差不齊，批量表達(dá)純化難度高，雜蛋白、核酸酶污染干擾轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物；

2）異源酵母/原核 mtRNAP與人源啟動(dòng)子識(shí)別存在物種差異，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)無(wú)法直接復(fù)刻人體生理機(jī)制；

3）單一酶蛋白貨源稀缺，整套線粒體轉(zhuǎn)錄重組蛋白采購(gòu)渠道分散，實(shí)驗(yàn)體系難以標(biāo)準(zhǔn)化；

微量轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物易降解，搭配普通純化柱回收率低，下游測(cè)序、功能檢測(cè)無(wú)穩(wěn)定樣本。

針對(duì)線粒體生理、腫瘤代謝、衰老機(jī)制科研需求，美國(guó)Enzymax 推出#81 Human mtRNAP 人源線粒體 RNA 聚合酶，高活性重組純化蛋白，搭配配套 mtTFA、mtTFB2 轉(zhuǎn)錄因子，可完整搭建人體線粒體體外轉(zhuǎn)錄體系，是線粒體方向頂刊實(shí)驗(yàn)標(biāo)配工具蛋白。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

1.人源全長(zhǎng)重組蛋白，匹配人體線粒體啟動(dòng)子

區(qū)別酵母、嚙齒類同源 mtRNAP，可精準(zhǔn)識(shí)別人類線粒體輕鏈/ 重鏈啟動(dòng)子，實(shí)驗(yàn)結(jié)果貼合人體生理通路，避免物種差異帶來(lái)的數(shù)據(jù)偏差。

2.高活性低雜酶污染，轉(zhuǎn)錄背景極低

嚴(yán)格多重質(zhì)控去除核酸酶、蛋白酶雜質(zhì)，微量體外轉(zhuǎn)錄也能獲得清晰完整 RNA 產(chǎn)物，適配低豐度線粒體轉(zhuǎn)錄本分析。

3.整套線粒體轉(zhuǎn)錄蛋白配套齊全，一站式構(gòu)建重構(gòu)體系

同品牌同步提供 #82 mtTFA、#83 mtTFB2 核心轉(zhuǎn)錄因子，三者組合即可搭建完整人體線粒體體外轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)，無(wú)需跨品牌搭配，體系重復(fù)性更高。

4.長(zhǎng)期儲(chǔ)存穩(wěn)定性強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性佳

優(yōu)化甘油保護(hù)緩沖液，-80℃穩(wěn)定存放 12 個(gè)月，分裝后多次取用酶活無(wú)明顯衰減，適合長(zhǎng)期大批量機(jī)制實(shí)驗(yàn)。

5.適配多下游實(shí)驗(yàn)，配套品牌純化耗材無(wú)縫聯(lián)用

轉(zhuǎn)錄完成后可直接搭配 EZCR304 RNA 純化濃縮試劑盒、EZC107 微量 RNA 離心柱回收產(chǎn)物，用于 RNA 測(cè)序、5'RACE、轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)鑒定。

產(chǎn)品應(yīng)用：

1.人體線粒體體外轉(zhuǎn)錄體系重構(gòu)（cat#81、#82、#83組合）

體外還原線粒體基因轉(zhuǎn)錄全過程，研究啟動(dòng)子識(shí)別、轉(zhuǎn)錄起始、流產(chǎn)轉(zhuǎn)錄、延伸調(diào)控分子機(jī)制，線粒體基礎(chǔ)研究經(jīng)典體外模型。

2.衰老、氧化應(yīng)激線粒體穩(wěn)態(tài)機(jī)制研究

探究氧化損傷、ROS 應(yīng)激如何調(diào)控 mtRNAP 轉(zhuǎn)錄活性，解析衰老細(xì)胞線粒體轉(zhuǎn)錄抑制通路。

3.腫瘤代謝與靶向藥物篩選

POLRMT 是腫瘤代謝關(guān)鍵靶點(diǎn)，利用 h-mtRNAP 體外體系篩選 POLRMT 小分子抑制劑，開發(fā)抗腫瘤候選藥物。

4.線粒體遺傳病致病機(jī)理解析

檢測(cè) mtDNA 突變、線粒體轉(zhuǎn)錄因子缺陷對(duì) mtRNAP 轉(zhuǎn)錄效率的影響，闡釋線粒體疾病發(fā)病分子機(jī)制。

5.NAD?修飾非經(jīng)典帽結(jié)構(gòu) RNA 研究

mtRNAP 可高效生成 NAD?/NADH 修飾 5' 端 RNA，用于新型 RNA 表觀修飾、轉(zhuǎn)錄組 5' 端圖譜分析。

產(chǎn)品信息：

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