5' 端轉錄組利器｜Enzymax #88 RppH RNA 5' 焦磷酸水解酶

背景簡介：

原核生物新生轉錄本、體外轉錄 RNA 天然攜帶5' 三磷酸基團（ppp-RNA），而 RNA 連接酶、5'RACE、5' 端高通量測序僅識別5' 單磷酸 RNA（p-RNA），三磷酸結構會直接阻斷接頭連接，大幅降低文庫有效 reads、擴增無條帶。

傳統實驗存在多重難題：

1.經典TAP 煙草焦磷酸酶供貨不穩定，僅能處理真核帶帽 mRNA，無法單獨處理原核三磷酸轉錄本；

2.市面同類 RppH 雜酶污染嚴重，微量 RNA 極易降解，低豐度新生轉錄本回收率極低；

3.脫帽酶僅能去除真核 m?G 帽，無法處理無帽的 5' 三磷酸原核 RNA，兩套酶體系分開操作流程繁瑣；

4.酶儲存穩定性差，反復凍融后活性斷崖式下跌，大批量轉錄組實驗重復性差。

針對原核轉錄圖譜、nascent RNA 新生轉錄組、5'RACE、小 RNA 建庫需求，美國Enzymax 推出#88 RppH 重組大腸桿菌 RNA 5' 焦磷酸水解酶，專一水解 RNA 5' 端焦磷酸，將 ppp-RNA 轉化為可連接接頭的 p-RNA，可與 #94 Tobacco Decapping Plus 2 脫帽酶聯用，一次性同步處理真核加帽 mRNA + 原核三磷酸轉錄本，實現全轉錄本 5' 端同步分析。

產品優勢：

1.專一水解 5' 三磷酸 RNA，可替代 TAP

特異性切除 ppp-RNA 末端焦磷酸基團，高效生成 5' 單磷酸 RNA，適配原核新生轉錄本、體外轉錄 RNA 處理，可直接替代停產 TAP 用于小 RNA 建庫實驗，數據可橫向比對。

2.超高蛋白純度，零雜酶干擾

重組蛋白嚴格純化，無核酸酶、蛋白酶殘留，微量低豐度 RNA 樣本不會發生降解，保障 5' 端測序、RACE 實驗低背景。

3.儲存穩定性優異，長期實驗重復性強

專用甘油穩定緩沖液，-80℃存放 12 個月酶活無明顯衰減，分裝后多次取用性能穩定，適合大批量轉錄組樣本批量處理。

4.可與脫帽酶聯用，一站式全轉錄本處理

搭配 #94 Tobacco Decapping Plus 2 全能去帽酶，同步完成真核加帽 mRNA 脫帽、原核三磷酸 RNA 去焦磷酸，統一轉化為 5' 單磷酸 RNA，一套流程搞定真核 + 原核樣本。

5.適配下游全套純化耗材，無縫銜接實驗

酶促反應結束后，可直接使用 EZCR304 RNA 純化濃縮試劑盒、EZC107 微量 Tini 柱回收 RNA，去除酶、鹽離子雜質，高效保留微量轉錄本。

產品應用：

1.原核新生轉錄本 dRNA-seq、5' 端轉錄起始位點圖譜分析（核心應用）處理細菌原生無帽 5' 三磷酸 mRNA/sRNA，轉化為單磷酸 RNA 后連接測序接頭，富集真實轉錄起始片段，精準定位啟動子區域。

2. 5' RACE 全長基因克隆（搭配 #94 脫帽酶黃金組合）真核 mRNA 經 #94 脫帽、原核轉錄本經 #88 RppH 去焦磷酸，全部生成 5' 單磷酸 RNA，大幅提升接頭連接效率，穩定擴增全長未知 5' 端序列。

3.小RNA 高通量測序文庫構建替代傳統 TAP 酶處理三磷酸化小 RNA，提高小 RNA 克隆效率，用于線蟲、細菌小 RNA 轉錄組研究。

4. RNA 降解、mRNA 穩態分子機制體外重構模擬細菌體內 RppH 介導的 5' 端依賴 RNA 降解通路，解析 RNA 結合蛋白、核酸酶調控 RNA 穩定性機制。

5.體外轉錄、mRNA 疫苗原料質控體外轉錄產物去除 5' 三磷酸基團，用于人工帽類似物、非經典 NAD?修飾 RNA 的酶活驗證與功能檢測。

產品信息：

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